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高脂樣本甘油三酯（TG）酶法測定試劑盒

原理：（1）脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油；（2）甘油激酶將甘油磷酸化為3-磷酸甘油；（3）3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過氧化氫；在過氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺，其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍：適用于動(dòng)物實(shí)體組織、培養(yǎng)細(xì)胞樣品中甘油三酯含量的測定。

操作步驟：

一 組織細(xì)胞裂解：（在裂解前，組織或者細(xì)胞用PBS洗滌兩次以去除甘油）

1.原代脂肪細(xì)胞：2000g，5分鐘離心收集細(xì)胞。建議每100 µl壓積（Packed Cell Volume）脂肪細(xì)胞加入1ml裂解液，震蕩裂解，而后室溫靜

置10分鐘。

2.分化脂肪細(xì)胞或非脂肪細(xì)胞：可先用胰酶消化、離心收集細(xì)胞而后進(jìn)行裂解，也可直接在培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行裂解。通常情況下，(6孔板單孔約為2x10⁶ 個(gè)細(xì)胞，75cm²瓶約為1x10⁶ 個(gè)細(xì)胞)可按比例每1x10⁶ 個(gè)細(xì)胞加入0.1ml裂解液，混勻后室溫靜置10分鐘。

3.動(dòng)物組織：離心管精確稱重，加入組織塊后再稱重，二者相減(即減量稱重法)計(jì)算組織重量(約50mg)。強(qiáng)烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。強(qiáng)烈建議裂解液用量在1ml左右，保證有效的勻漿裂解與脂質(zhì)提取。用電動(dòng)高速勻漿器或手動(dòng)玻璃勻漿器破碎組織。（不超聲方法，因其不能*和均勻破碎。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整初始的組織細(xì)胞加入量），勻漿后靜置10分鐘。

高脂樣本甘油三酯（TG）酶法測定試劑盒