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組織細(xì)胞總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒（ABTS法）

細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集新鮮細(xì)胞(如果是貼壁細(xì)胞，請(qǐng)用細(xì)胞刮刮下，不宜使用胰酶和EDTA消化)，PBS洗滌細(xì)胞一次，離心收集細(xì)胞，吸盡上清。加入200μl預(yù)冷的組織細(xì)胞裂解液，超聲破碎細(xì)胞釋放其中的抗氧化物。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于總抗氧化能力的測(cè)定。不立即測(cè)定的樣品可以-70℃保存。如果樣品中總抗氧化能力超出測(cè)定范圍，可利用組織細(xì)胞裂解液適當(dāng)稀釋后測(cè)定，稀釋倍數(shù)請(qǐng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定。

 組織樣品的準(zhǔn)備：取20mg組織，加入400μl的預(yù)冷的組織細(xì)胞裂解液，用勻漿器冰浴勻漿。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于總抗氧化能力的測(cè)定。不立即測(cè)定的樣品可以-70℃保存。如果樣品中總抗氧化能力超出測(cè)定范圍，可利用組織細(xì)胞裂解液適當(dāng)稀釋后測(cè)定，稀釋倍數(shù)請(qǐng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定。  

總抗氧化能力檢測(cè)工作液的配制：按比例混合ABTS溶液和氧化劑溶液，室溫避光放置6小時(shí)；然后利用PBS稀釋30-50倍，測(cè)定A_734nm，根據(jù)吸光度值調(diào)整稀釋倍數(shù)，至吸光度A_734nm為0.7±0.05，即為總抗氧化能力檢測(cè)工作液。

利用標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)制作Trolox抗氧化能力標(biāo)準(zhǔn)曲線，并獲得橫縱坐標(biāo)之間的函數(shù)關(guān)系式，然后利用各樣品的吸光度值計(jì)算樣品的總抗氧化能力。對(duì)于細(xì)胞和組織樣品，可以根據(jù)樣品中蛋白濃度測(cè)定，計(jì)算每毫克蛋白中總抗氧化能力。

組織細(xì)胞總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒（ABTS法）